33-åringen som også hadde verdensrekorden med 9,79 sekunder i mer enn tre år, sier han pådro seg skaden på trening i januar.
– Jeg går offentlig ut og forteller at karrieren min på friidrettsbanen er over, fortalte han på en pressekonferanse i Beijing mandag.
– Jeg klarer ikke å stålsette meg på å komme tilbake fra skade enda en gang. Det koster for mye, både fysisk og psykisk, sa Greene.
– Selvsagt skulle jeg gjerne ha vært med i OL her i Beijing, men jeg innser at det blir for tøft, og derfor håper jeg at andre og nye navn kan skinne på den olympiske stjernehimmelen, sa amerikaneren.
Han som kommer fra Kansas City, slo gjennom med VM-gull på 100 meteren i Aten-VM i 1997. Han satte verdensrekorden sin i Aten i 1999 og slettet da Donovan Bailey gamle rekord fra listene en gang for alle.